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原代细胞分离与培养

原代细胞是来源于胚胎、组织器官及外周血样本经特殊实验方法处理而制备的原初培养细胞,这一过程被称为原代细胞分离。原代细胞具有保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。

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细胞的分离纯化和细胞培养技术是细胞生物学实验的基础,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞。原代细胞培养是指将组织从动物体内取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA) 或机械方法剪碎处理,分散成单细胞,在合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖的过程。

原代细胞分离和培养项目
大鼠骨髓间充质干细胞原代培养小鼠海马神经元细胞原代分离培养细胞传代培养
大鼠膝关节软骨细胞的原代培养心肌成纤维细胞(CFs)原代培养内皮细胞培养
大鼠脂肪间充质干细胞原代培养骨髓内皮组细胞原代培养胃上皮细胞培养
脂肪/骨髓/牙源间充质干细胞小鼠海马/大鼠脊髓神经元细胞神经元细胞培养
人眼眶/大鼠心肌成纤维细胞乳鼠心肌细胞培养操作滑膜细胞原代培养
牛视网膜/小鼠脑微血管内皮细胞大白兔/大鼠膝关节软骨细胞小鼠巨噬、小胶质/大鼠肝细胞

 原代细胞分离与培养方法 

悬浮细胞的分离方法:组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。

实体组织材料的分离方法:对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

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